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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
碳水子自己的的冗杂性和多个N-glycoproteins低体现能力导致对N-glycosylation型式的定量分析的分析特别难度。在在线检测低丰度的N糖基化呈现核淀粉酶或肽段时,中间添加大规模未呈现的核淀粉酶肽断,这很特别容易将低丰度的糖基化呈现核淀粉酶肽段的预警掩饰。凝素亲和法是当今糖核淀粉酶质组学中应运更广泛的分割聚集的方法。凝集素(lectin)就是类糖融合核淀粉酶质,能缜密识别系统目标特殊的型式的单糖或聚糖中目标的糖基回文序列而与之融合,我们与糖链可逆转非共价融合,糖核淀粉酶或糖肽被凝集素阻止后来,大多数用目标的单糖借助寡头垄断融合凝集素将糖核淀粉酶或糖肽冲洗掉掉了。 营养物质酶质过酶解后确定凝集素(lectin)含有N-糖基化肽段,接着用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中割除连结在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该操作原因浅析Asn大原子核式量增强2.9890Da。最后一步用高精密度较LC-MS质谱仪查重脱糖后的肽段,采用查找信息库,查证脱糖后大原子核式量与其说说法大原子核式量的变现和糖基化绘制肽段的编码序列,最后确立该营养物质酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点确立然后,再确定label-free的设计原理对其确定定量浅析浅析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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